固相多肽合成切割方法
來源
:
西安尊龍凱時生物科技有限公司 日期
:08-02 694 屬於
:常見問答
固相多肽合成完成之後
,必須選擇合適的切割試劑將多肽從樹脂上切割下來
,然後經過冰乙醚沉澱
,離心收集沉澱
,經過HPLC分離純化
,冷凍幹燥得到後產品
。由於選擇的樹脂不同
,氨基酸序列不同
,在切割時候,選擇的切割方法也不完全相同
,一般都是選擇酸性條件下切割的條件
,對於Wang
,Rink-Amide,2-Cl脂
,一般采用TFA切割
,切割過程中加入
,乙二硫醇
,苯甲硫醚
,水
,三異丙基矽烷
,苯酚等。這些添加試劑主要作為碳正離子俘獲試劑使用
,目的是俘獲切割反應過程中生成的碳正離子
,減少這些碳正離子對部分氨基酸側鏈的進攻導致的副反應
。切割試劑用量一般10-15ml/g樹脂
。常用的切割配比
: TFA/TIS/EDT/H2O(94/1/2.5/2.5)
,反應一般是在室溫條件下2h-4h
。
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?
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